الفهرس 
LIST OF CONTENTSOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 100 |  |  |
| | | from | 100 | | |
Abstract
الهدف من هذة الرساله محاولة التعرف على العترات المنتشرة من فيروس النزف الدموى الفيروسى فى الارانب فى محافظات مصر المختلفة وعرض طرق التحكم والحماية من خلال تحضير وتقييم لقاحات مختلفة من العترات المعزوله محليا ومقارنتها مع لقاحات مستوردة ومحليه تستعمل فى الحقل.
أولا:التحديد الجزيئى لفيروس النزف الدموى الفيروسى:
لتحقيق هذا الهدف تم تجميع عشرين عينة من قطعان الارانب من محافظات مصر وجه بحرى وقبلى اثناء سنة 2020 و 2021.
عانت الارانب التى تم فحصها من عدم تناول الطعام وافرازات الانف الرغوية الملطخة بالدم والموت المفاجئ بينما الصفه التشريحيه للارانب الميته حديثا اظهرت نخرا(تليف) مفصصا فى الكبد ، احتقان الطحال النزفى ، نزف الكلى وكذلك الالتهاب النزفى للقصبات الهوائيه.تم التعرف على هذة العينات من خلال اختبار تلازن الدم والتوصيف الجزيئى باستخدام تفاعل إنزيم البلمرة المتسلسل التى تستهدف جزء من VP60 لفيروس النزف الدموى الفيروسى.
** أظهرت النتائح ان سبعة عشر عينه من عشرين عينة كانت إيجابية لفيروس النزف الدموى الفيروسى.
بعد ذلك تم إجراء تحليل التسلسل والتطور بنجاح لتسع عينات ومقارنتها بالتسلسلات الاخرى الموجودة على بنك الجينات.
**تم تحديد نمطيين وراثيين من خلال هذا التحليل ،ست سلالات تابعين منهم ل فيروس النزف الدموى الفيروسى 2 وثلاث سلالات اخرى تابعين لفيروس النزف الدموى الفيروسى أ.
ثانيا:تحضير وتقييم الفعالية الوقائية للقاح المتماثل ضد فيروس النزف الدموى الفيروسى أ وب ومقارنتها باللقاحات التجارية المتوفرة بالإضافه الى تحديد الحمايه المتبادلة بين فيروس النزف الدموى الفيروسى أ و ب.
تم تحضير اللقاحات من العترات المعزولة محليا وفقا ل المنظمة العالمية لصحة الحيوان 2021 ,هذة اللقاحات تم فحص تعقيمها من خلال زرعها على اجار مغذى واجار خاص بالفطريات بينما تم التحقق من سلامة اللقاح عن طريق حقن 10 ارانب (5 ارانب/لقاح) تحت الجلد بجرعه مضاعفه من اللقاح ومراقبة هذه الارانب لمدة ثلاث اسابيع
واخيرا تم تقييم فاعلية اللقاح بالاعتماد على الاستجابة المناعية التى تم تحديدها من خلال اختبار تثبيط تلازن الدم واختبار التحدى والتى تحققت من خلال التجربة التالية:
حوالى 150 ارنب تم تقسيمهم بالتساوى الى خمس مجموعات (30 ارنب /مجموعة).المجموعه الاولى تم تطعيمها تحت الجلد عند عمر شهرين ب 0.5 مل من اللقاح المصنع محليا من فيروس النزف الدموى الفيروسى أ ، المجموعه الثانية تم تطعيمها عند نفس العمر والجرعة بالقاح النزف الدموى الفيروسى أ المستورد بينما المجموعه الثالثه تم تطعيمها باللقاح المصنع محليا من فيروس النزف الدموى الفيروسى ب ، المجموعة الرابعه تم تحصينها عند نفس العمر والجرعة باللقاح النزف الدموى الفيروسى ب المستورد واخيرا تم الاحتفاظ بالمجموعة الخامسة كمجموعة ضابطة.
تم تجميع عينات قبل التحصين و خلال ثلاثة اسابيع متتاليه من التحصين وتحديد عيار الاجسام المناعية من خلال اختبار تثبيط تلازن الدم.
تم فصل عشرين ارنب من كل مجموعة تم تطعيمها بالتحصين المحلى فى بطاريات منفصله وذلك للعدوى فى الاسبوع الثالث بعد التحصين ,عشرة منهم تم حقنهم ب فيروس النزف الدموى الفيروسى أ المحلى فى العضل بجرعة 1 مل /ارنب بمقدار 100LD50 وعدوى الاخرين بفيروس النزف الدموى الفيروسى ب بنفس الجرعة والطريقه.بينما انقسمت المجموعة الضابطه الى 3 مجموعات فرعية احداهما تم حقنها ب فيروس النزف الدموى الفيروسى أ والاخرى بفيروس النزف الدموى الفيروسى ب بينما بقيت المجموعه الاخيرة كمجموعه ضابطه سلبيه (غير محصنه وغير مصابة ).تمت مراقبة الاعراض والوفيات والصفة التشريحية لمدة اسبوعين بعد العدوى .تم تجميع عينات السيرم من الارانب الحية فى الاسبوع الاول والثانى بعد العدوى لعمل اختبار تثبيط تلازن الدم.
**أظهرت النتايج ان اللقاحات المحضرة معقمة وامنه بالاضافة الى ان اللقاحات المتماثله حققت مستوى معنوى من الحماية ولكن لايوجد فرق معنوى بين اللقاحات المحلية واللقاحات المستوردة بالإضافه انه لايوجد حماية متبادلة بين السلالتين المعزولتين محليا.
ثالثا: تحضيير وتقييم فعالية لقاح المستحلب الزيتى الثنائى لفيروس النزف الدموى الفيروسى مع مقارنتة باللقاح المحلى الثنائى لمعهد الامصال واللقاحات البيطريه بالعباسية.
تم تقييم اللقاحات المصنعه من حيث التعقيم والسلامة وفقا ل المنظمة العالمية لصحة الحيوان 2021.
تقييم فاعلية اللقاح بالاعتماد على الاستجابة المناعية التى تم تحديدها من خلال اختبار تثبيط تلازن الدم واختبار التحدى والتى تحققت من خلال التجربة التالية:
تم تقسيم 90 ارنب نيوزيلاندى الى 3 مجموعات . المجموعة الاولى محصنة بتحصين ثنائى التكافؤ لفيروس النزف الدموى الفيروسى المحضر محليا ، المجموعة الثانيه محصنة بتحصين العباسيه ثنائى التكافؤ والمجموعه الثالثة تبقى كمجموعه ضابطه. تم تقييم الفعاليه من خلال التحليل المصلى باستخدام اختبار تثبيط تلازن الدم والعدوى بالسلالات المسببة للمرض فيروس النزف الدموى الفيروسى أ و ب.
**أظهرت النتايج ان مجموعتين الارانب اظهروا حماية كامله ضد فيروس النزف الدموى الفيروسى أ و ب ولكن لا يوجد فرق كبير بين المجموعتين.