الفهرس 
IntroductionOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 82 |  |  |
| | | from | 82 | | |
Abstract
الإجهاد التأكسدي (OS) هو أحد الجوانب العديدة التي تؤثر في كفاءة البويضات المنماه معمليا. ينتج الإجهاد التأكسدي أساسا عن أيض الحيوانات المنوية والبويضات والأجنة كمنتج ثانوي. لذا ونتيجة لذلك يجب حماية البويضات من الإجهاد التأكسدي من أجل إنتاج أجنة ذات كفاءه عالية. ذلك الخلل في إنماء البويضات معمليا فرض على الباحثين وبصوره ملحة ضرورة توفير مضادات الأكسدة المناسبة للسيطرة على الإجهاد التأكسدي في بيئة نمو البويضات.لذا هدفت الدراسة الحالية الى إستكشاف تأثير التركيزات المختلفة للكايمبفيرول كمضاد للأكسدة على الكفاءة التنموية لبويضات الجاموس المنماه معمليا وذلك عند دمجه في بيئة النضج الخاص بها، وكذلك تقييم تأثير التركيزات المختلفة للكايمبفيرول على مستويات الجذور الحرة المتولدة داخل بيئة النمو، هذا بالإضافة الى دراسة تأثيره على قدرة البويضات المنماه معمليا في مكافحة الاجهاد التأكسدي.إجمالا أثبتت الدراسة الحالية أن الكايمبفيرول يحسن الكفاءة التنموية لبويضات الجاموس المنماه معمليا من خلال تحسين مستوى النضج السيتوبلازمى للبويضات، قمع مستويات الجذور الحرة، كما أن الكايمبفيرول يقوم على تعزيز دفاعات البويضات المضادة للأكسدة على مستوى كلا من السيتوبلازم والميتوكوندريا.تم إجراء البحث في معهد بحوث التناسل الحيواني ومركز البحوث الزراعية بالهرم، الجيزة، مصر. في الدراسة الحالية تم جمع المبايض من مجزر الشرقاوي بهتيم بشبرا الخيمة. تم استخدام محلول معقم من الفوسفات المتعادل مسبق التسخين عند 35-37 درجة مئوية ومضافا الية 100 وحدة دولية / مل من البنسلين لنقل المبايض المجمعة من المجزر إلى المختبر في غضون ساعتين. تضمن الإجراء المختبري غسل المبايض المسترجعة عدة مرات في محلول فوسفات المتعادل الدافئ ثم في محلول ملحي عادي ومن ثم تم زرع البويضات المختارة في بيئة نمو199 TCM-وذلك لمده 22 ساعة عند مستويات 10%مصل العجل الجنيني ,10ميكرو جرام/مل الهرمون المنشط للاباضه ,5ميكروجرام/مل الهرمون المنشط لحويصلة جراف ,1ميكروجرام/ مل هرمون الاستراديول ,2.2ملجم/مل بيروفات الصوديوم,100ملجم/مل ستربتومايسين و100 وحده دوليه / مل بنسيللين وفي كل التجارب يتم اضافه الكايمبيفيرول بتركيز 5ميكروجرام/مل ,10ميكروجرام/مل و15 ميكروجرام/مل الي وسط النمو. • تأثير التركيزات المختلفة من الكايمبفيرول (5، 10 ،15 ميكروغرام / مل) على معدل تمدد الخلايا الركامية: أظهرت النتائج الحالية وجود فروق ذات دلالة إحصائية عالية عند (P <0.01) بين بويضات الجاموس المختلفة المعالجة بـالكايمبفيرول حيث كان هناك تحسن كبير في النسبة المئوية لبويضات الجاموس التي تظهر تمددًا كاملاً مع 10 ميكروغرام / مل من الكايمبفيرول (75.33 ± 1.75 ٪)، مقارنةً بمجموعة البويضات المعالجة بالكايمبفيرول عند مستوى (المجموعة الضابطة، 5، 15 ميكروغرام / مل) حيث أظهرت المجموعات أقل السجلات (49.69 ± 1.92، 61.13 ± 3.72، 59.76 ± 2.42٪، على التوالي). لكن بالنسبة لخلايا الركام المتمددة بشكل معتدل: أظهرت مجموعات البويضات (المجموعة الضابطة، 5 ، 15 ميكروغرام / مل أعلى نسبة مسجلة (48.56 ± 2.25، 37.98 ± 3.56 و 38.98 ± 2.36٪، على التوالي) إذا ما قورنت بـ 10 ميكروغرام / مل من كايمبفيرول (24.33 ± 1.74٪).•تأثير التركيزات المختلفة من الكايمبفيرول (5 ،10، 15 ميكروغرام / مل) على معدل الإخصاب: أظهرت النتائج الحالية أن إنضاج بويضات الجاموس معمليا في بيئة نمو مضاف اليها كايمبفيرول أظهرت دلالات أحصائيه معنويه عند (P <0.01). حيث أظهرت المجموعة المعالجة بـ 10 ميكروغرام / مل من كايمبفيرول أكبر نسبة نضج، وكذلك أعلى معدلات إختراق وتخصيب للحيامن (87.08 ± 1.16٪ ، 78.40 ± 3.75٪ و 42.80 ± 1.15٪ على التوالي) مقارنة بالمجموعة الضابطة (بدون معالجة) (66.32 ±5.39 ،58.20 ± 1.22 و 31.90 ± 0.75 على التوالي) ، 5 ميكروغرام / مل (77.60 ± 4.59، 68.10 ± 0.75 و 37.80 ± 3.13 على التوالي) ، 15 ميكروغرام / مل (73.32 ± 3.12، 59.20± 0.84 و 30.30 ± 3.29٪ على التوالي).• تأثير التركيزات المختلفة من الكايمبفيرول (5 ،10، 15 ميكروغرام / مل) على معدل الانقسام والتوتية والكيسة الأريمية: أظهرت النتائج فرقا معنويا في معدلات إنقسام الجنين، والتوتية، وتكوين الكيسة الأريمية بين مجموعات البويضات المختلفة المعالجة بالكامبفيرول عند (P <0.01). حيث أظهرت مجموعة البويضات المعالجة بـ 10 ميكروغرام / مل من الكايمبفيرول أكبر زيادة في معدل إنقسام الجنين وتطور كلا من التوتية والكيسة الأريمية (28.20 ± 3.51، 21.70 ± 2.65 و19.90 ± 2.45٪، على التوالي). وذلك اذا ما قورنت بكلا من المجموعة الضابطة (16.40 ± 1.21، 9.68± 0.34 و 6.69 ± 1.98٪ ، على التوالي) ، 5 ميكروغرام / مل (21.00 ± 2.34 ، 13.80 ± 1.76 ، 7.62 ± 1.28٪ ، على التوالي) ، 15 ميكروغرام / مل (14.60 ± 2.41 ، 8.66 ± 1.09 و 6.74 ± 1.33٪ على التوالي).كما هدفت الدراسة الثانية إلى تقييم تأثير التركيزات المختلفة من الكايمبفيرول (5 ،10، 15 ميكروغرام / مل) على مستويات الجذور النشطة المتولدة مثل أوكسيد النيتريك ومالونديالدهيد وبيروكسيد الهيدروجين، هذا بالإضافة الى تقييم قدرة الكايمبفيرول على رفع قدرة البويضات المنماه معمليا على مكافحة الاجهاد التأكسدي عن طريق رفع مستويات إنزيمات قمع الجذور الحرة مثل سوبر أوكسيد ديسميوتيز والجلوتاثيون) ونشاط الميتوكوندريا.• تأثير التركيزات المختلفة من الكايمبفيرول (5 ،10، 15 ميكروغرام / مل) على بيروكسيد الهيدروجين (H2O2)، وأكسيد النيتريك (NO)، ومالونديالدهيد (MDA) في بويضات الجاموس الناضجة في المختبر.أظهرت النتائج فرقا معنويا بين البويضات الجاموس المعاملة بالكامبفيرول فيما يتعلق بمستويات H2O2، NO، MDA في البويضات الناضجة عند مستوي (P <0.01).
أظهرت مجموعة البويضات المعالجة بـ 10 ميكروغرام / مل من الكايمبفيرول أقل مستويات من H2O2، NO، MDA (26.40 ± 2.27 نانوجرام / مل، 25.9 ± 2.63 نانومول / لتر و1.77 ± 0.17 نانومول / لتر، على التوالي)، خاصة إذا ما قورنت بالمجموعة الضابطة (39.90 ± 1.88 نانوجرام / مل، 37.0 ± 2.45 نانومول / لتر و 4.01 ± 0.29 نانومول / لتر، على التوالي)، 5 ميكروغرام / مل (34.60 ± 2.58 نانوجرام / مل، 33.0 ± 0.16 نانومول / لتر و 2.75 ± 0.08 نانومول / لتر، على التوالي) ، 15 ميكروجرام / مل (32.90 ± 2.08 نانوجرام / مل ، 35.0 ± 1.99 و 3.15 ± 0.14 نانومول / لتر ، على التوالي).• تأثير تراكيز كايمبفيرول المختلفة على إمكانيات إنتاج إنزيمات مضادات الأكسدة السيتوبلازمية والخاصة بالميتوكوندريا (SOD، GSH) في بويضات الجاموس المنماه معمليا. أظهرت النتائج الحالية فرقًا معنويًا ملحوظا عند (P <0.01) بين بويضات الجاموس المختلفة المعالجة بالكامبفيرول فيما يتعلق بـمستوى تخليق كلا من SOD ، GSH ، MTT حيث عزز 10 ميكروغرام / مل من الكايمبفيرول كفاءة إنزيمات مضادات الأكسدة الجوهرية مثل SOD ، GSH وكذلك معدل إنتاج الميتوكوندريا من SOD (33.70 ± 2.96 وحده /مل ، 5.51± 0.37 نانومول / جم و 4.46 ± 0.21 ، على التوالي) ، خاصةً إذا ما قورنت بالمجموعة الضابطة (16.50 ± 1.92 وحده /مل ، 93 ± 0.06 نانومول / جم و 2.32 ± 0.17 ، على التوالي ) ، 5 ميكروغرام / مل (22.00 ± 1.79 وحده / مل ، 3.20 ± 0.26 نانومول / جم و 3.29 ± 0.24 ، على التوالي) و 15 ميكروغرام / مل (15.10 ± 1.10 وحدة / مل ، 2.59 ± 0.29 نانومول / جم و 2.41 ± 0.11 ، على التوالي ).