الفهرس 
List of ContentsOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 126 |  |  |
| | | from | 126 | | |
Abstract
أجريت هذه الدراسة في معمل الأبحاث بقسم الكيمياء الحيوية – كلية الطب البيطري – جامعة بنها وذلك لتقييم تأثير فرط نشاط الغدة الدرقية وقصور الغدة الدرقية، الناجم عن إل- ثيروكسين والعلامات الحيوية المؤكسدة التي يسببها الكارباميزول، السيتوكينات الالتهابية، وعوامل النمو، والتغيرات الجزيئية والمسارات داخل الخلايا النشطة في الغدة الدرقية والكبد. علاوة على ذلك، تقييم الآثار الوقائية والمضادة للالتهابات المحتملة لمضادات الأكسدة التي تحدث بشكل طبيعي (سبيرولينا وخلاصة بروانثوسيانيدين من بذور العنب) في فرط نشاط الغدة الدرقية وقصور الغدة الدرقية في الفئران وتقييم العوامل الكيميائية الحيوية والجزيئية في أنسجة الدم والكبد والغدة الدرقية.
أجريت هذه الدراسة علي إجمالي عدد 96 فأر تتراوح أوزانها بين 140 – 160 جرام. تم تقسيم الفئران إلى مجموعتين تجريبيتين رئيسيتين، تم إيواؤها في أقفاص فردية، وتم تصنيفها على النحو التالي:
I- التجربة الأولى (أ): فرط نشاط الغدة الدرقية الناجم عن عقار الإلتروكسين بجرعة (50، 100، 200 ميكروجرام / كجم) من وزن الفأر مرة واحدة يوميًا عن طريق الفم لمدة ثلاثة أسابيع على التوالي.
II- التجربة الثانية (ب): قصور الغدة الدرقية الناجم عن عقار الكاربيمازول بجرعة (1.8 مجم / كجم) من وزن الفأر عن طريق الفم.
تجربة فرط نشاط الغدة الدرقية (أ): تم تقسيم الفئران إلى ستة مجموعات متساوية كالأتى:
1- المجموعة الأولى (المجموعة الضابطة): لم تعطى أي أدوية واستخدمت كمجموعة ضابطة للمجموعات الأخرى.
2- المجموعة الثانية ( مجموعة فرط نشاط الغدة الدرقية): تم إعطاء الفئران إل-ثيروكسين (50، 100، 200 ميكروجرام / كجم) للأسابيع الثلاثة الأولى على التوالي مرة واحدة يوميًا عن طريق الفم.
3- المجموعة الثالثة (مجموعة مستخلص بذور العنب بروأنثوسياندين الوقائية): ثم تجريع الفئران بروانثوسيانيدين عن طريق الفم مرة واحدة يوميا فى الصباح بجرعة مقدارها 150 مليجرام لكل كيلوجرام من وزن الفأر خلال الأسابيع الثلاثة الأولى واستمر التجريع مع إل-الثيروكسين لمدة 3 أسابيع أخرى.
4- المجموعة الرابعة (مجموعة مستخلص بذور العنب بروأنثوسياندين العلاجية): تم تجريع الفئران إل-ثيروكسين (50، 100، 200 ميكروجرام / كجم) للأسابيع الثلاثة الأولى على التوالي ثم بروانثوسيانيدين لمدة ثلاثة أسابيع أخرى كما في المجموعة 3.
5- المجموعة الخامسة (مجموعة سبيرولينا الوقائية): تم تجريع الفئران سبيرولينا عن طريق الفم مرة واحدة يوميا بجرعة مقدارها (300 مليجرام لكل كيلوجرام من وزن الفأر خلال الأسابيع الثلاثة الأولى واستمر التجريع مع إل-الثيروكسين لمدة 3 أسابيع أخرى.
6- المجموعة السادسة (مجموعة سبيرولينا العلاجية ): تم تجريع الفئران إل-ثيروكسين (50، 100، 200 ميكروجرام / كجم) للأسابيع الثلاثة الأولى على التوالي ثم سبيرولينا لمدة ثلاثة أسابيع بجرعة (300 مليجرام لكل كيلوجرام من وزن الفأر).
تجربة قصور الغدة الدرقية (ب): إشتملت على 6 مجموعات مماثلة للتصميم أعلاه في تجربة فرط نشاط الغدة الدرقية (أ) ولكن جرعة كاربيمازول مستقرة (1.8 مجم / كجم وزن حي) في 3 أسابيع.
العينات:
عند نهاية التجربة والتي استمرت ستة أسابيع تم تجميع عينات دم عشوائية وعينات من الانسجة (الكبد والغدة الدرقية) من جميع مجاميع الفئران (الضابطة والمصابة).
عينات الدم:
تم جمع عينات الدم بعد الصيام طوال فترة الليل من الجيب الوريدي خلف العين في أنابيب نظيفة، جافة ومعقمة وترك العينة 15 دقيقة حتى تتجلط ثم فصل المصل بواسطة جهاز الطرد المركزي وذلك عند سرعة 3000 لفة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة بعدها تم جمع المصل في أنابيب جافة ومعقمة بواسطة ماصة اتوماتيكية وتم حفظ المصل في المجمد عند درجة 20˚ مئوية تحت الصفر وذلك لإجراء القياسات البيوكيميائية الآتية:الكوليسترول الكلى، الدهون الثلاثية، الهرمون المنبه للغدة الدرقية وثلاثي يود الثيرونين والثيروكسين.
عينات الانسجة:
بعد الحصول على الكميات الكافية من الدم، تم ذبح الفئران وفتح البطن وفصل الكبد ثم غسله جيداً بمحلول ملح فسيولوجي (0.9%) ثم وضع جزء من أنسجه الكبد في ورق فويل وتم الاحتفاظ بها في المجمد عند درجة حرارة 80˚ تحت الصفر حتى استخلاص الحمض النووي الريبوزي لقياس التعبير الجيني لكلا من: كاسباس 8 ، خلايا بيتا اللمفاوية-2 ، بروتين كيناز سي ألفا، ميكرو أر إن أيه -244، ميكرو أر إن أيه -382. بالإضافة إلى تحليل تلف الحمض النووي فى (الكبد) بإستخدام (فحص المذنبات).
عينات الهستوباثولوجى:
بعد 6 أسابيع من بداية التجربةَ تم فصل جزء صغير من الكبد والغدة الدرقية وتم حفظها في محلول فورمالين متعادل
10%، ثم تم تحضير العينات وصبغها بالصبغات الخاصة ووضعها على الشرائح ووضع الغطاء وتثبيته، ثم تم فحصها ميكروسكوبياً وتوصيفها وتصويرها عن طريق متخصص في علم الهستوباثولوجى.
وخلصت النتائج بعد تحليلها إحصائيا على الأتى:
العلاج والوقاية بواسطة بروانثوسيانيدين وسبيرولينا لفرط نشاط الغدة الدرقية:
أسفرت النتائج في مجموعة الفئران المحدث بها فرط نشاط الغدة الدرقية عن حدوث تغيرات كيميائية حيوية وجزيئية واضحة وذلك من خلال ظهور نقص فى مستوى الكوليسترول الكلى والدهون الثلاثية وهرمون تحفيز الغدة الدرقية والتعبير الجينى لخلايا بيتا اللمفاوية-2 وانخفاض مستوى التعبير الجيني في ميكرو أر إن أيه 382 و بروتين كيناز سي ألفا وزيادة تلف الحمض النووي في نسيج الكبد ، مع وجود زيادة في ثلاثي يود الثيرونين والثيروكسين بالمصل و وزيادة في مستوى التعبير الجيني لكاسباس 8 وميكرو أر إن أيه 224 بالكبد عند المقارنة بالمجموعة الضابطة الطبيعية. كما أوضحت النتائج أن مجموعة الفئران المحدث بها فرط نشاط الغدة الدرقية والتي تم علاجها وحمايتها بالسبيرولينا ومستخلص بذور العنب بروأنثوسياندين عن وجود زيادة في مستوى الكوليسترول الكلى والدهون الثلاثية وهرمون تحفيز الغدة الدرقية بالمصل و خلايا بيتا اللمفاوية-2, وزيادة في مستوى التعبير الجيني في ميكرو أر إن أيه 382 و بروتين كيناز سي ألفا ونقص تلف الحمض النووي مع انخفاض في ثلاثي يود الثيرونين والثيروكسين بالمصل والتعبير الجينى لكاسباس 8 ومستوى التعبير الجيني لميكرو أر إن أيه في 224فى نسيج الكبد مقارنة بالمجموعة المريضة.
العلاج والحماية بواسطة بروانثوسيانيدين وسبيرولينا لقصور الغدة الدرقية:
أسفرت نتائج التحليل افي مجموعة الفئران المحدث بها قصور نشاط الغدة الدرقية عن حدوث تغيرات كيميائية حيوية وجزيئية واضحة وذلك من خلال ظهور زيادة فى مستوى الكوليسترول الكلى والدهون الثلاثية وهرمون تحفيز الغدة الدرقية بمصل الدم و كاسباس 8 بالكبد وزيادة فى مستوى التعبير الجيني في ميكرو أر إن أيه 224 و بروتين كيناز سي ألفا مع وجود نقص في مستوى ثلاثي يود الثيرونين والثيروكسين بالمصل و خلايا بيتا اللمفاوية-2 وانخفاض في مستوى التعبير الجيني في ميكرو أر إن أيه 382 وزيادة تلف الحمض النووي، كما أوضحت النتائج أن مجموعة الفئران المحدث بها قصور نشاط الغدة الدرقية والتي تم علاجها وحمايتها بالسبيرولينا ومستخلص بذور العنب بروأنثوسياندين عن وجود نقص في تركيز الكوليسترول الكلى و الدهون الثلاثية وهرمون تحفيز الغدة الدرقية و كاسباس 8, وانخفاض في مستوى التعبير الجيني في ميكرو أر إن أيه 224 و بروتين كيناز سي ألفا وتقليل تلف الحمض النووي، ارتفاع في ثلاثي يود الثيرونين والثيروكسين و خلايا بيتا اللمفاوية-2 وزيادة في مستوى التعبير الجيني في ميكرو أر إن أيه 382.
وقد أثبتت الدراسة أن فرط وقصور نشاط الغدة الدرقية له تأثير ضار على المكونات الكيميائية الحيوية والجزيئية لمصل وأنسجة الكبد والغدة الدرقية للفئران والذى يرجع أساسا إلى تكوين الجذور الحرة التى تهاجم الخلية وأن تجريع السبيرولينا ومستخلص بذور العنب بروأنثوسياندين كان لهما دورا فعالاً فى تحسين التغير الحادث في مكونات المصل وأنسجة الكبد للفئران المحدث فيها اختلال وظيفة الغدة الدرقية لتعود إلي المعدل الطبيعي بالإضافة لدورهما في تحسين وتقليل تلف نسيج كبد الفئران. وخلصت الدراسة أيضا أن كلا من بروأنثوسياندين وسبيرولينا لهما تأثير علاجي ووقائي محتمل ضد تلف الكبد والتقليل من فرط نشاط وقصور الغدة الدرقية ، ويمكن أن تكون هذه العوامل الطبيعية المضادة للأكسدة قادرة على تعديل ارتفاع هرمونات الغدة الدرقية ، عن طريق المنع المباشر لـ ميكرو أر إن إيه 224، وتعزيز ميكرو أر إن إيه 382و بروتين كيناز سي ألفا ، وهو جزيء تحويل الإشارة الذي يعمل على تأثير منظمات و توازن وتحسين الأيض وإفراز هرمونات الغدة الدرقية وإستجابتها. لذلك توصي الدراسة باستخدام السبيرولينا ومستخلص بذور العنب بروأنثوسياندين كوسيلة وقائية أساسية ولازمة أثناء الإصابة بفرط وقصور نشاط الغدة الدرقية على أن يكون استخدامهما ضمن الجرعات العلاجية الآمنة والتي ربما قد تخفف من التأثيرات الخطيرة والغير آمنة وتحد من مضاعفات مثل هذا المرض.