الفهرس 
List of ContentsOnly 14 pages are availabe for public view
 |  | from | 140 |  |  |
| | | from | 140 | | |
Abstract
داء المتورقات هو مرض طفيلي يصيب مجموعة واسعة من أنواع الثدييات، بما في ذلك البشر. وهو ناتج عن المتورقة الكبدية والمتورقة العملاقة. وهذه المتورقة تلعب دورًا مهمًا في الحيوانات المجترة، حيث تتسبب في خسائر اقتصادية كبيرة بالإضافة إلى انتشاره وأهميته الاقتصادية لمخزون الحيوانات في جميع القارات، فإن داء المتورقات يسبب أيضًا قلقًا عامًا بسبب طبيعته الحيوانية حيث كان هناك عدد متزايد من التقارير عن إصابات بشرية بالفاشيولا الكبدية أو الفاشيولا العملاقة أو أشكالها الهجينة.
لذلك، تم التخطيط للهدف من الدراسة الحالية لتحقيق ما يلي:
1-الكشف عن دودة الفاشيولا في الحيوانات المذبوحة في المجازر وايضا الكشف عن بيض المتورقة في براز الحيوانات الحية (الأغنام والماعز والأبقار والجاموس والإبل).
2- الكشف عن بيض المتورقة في براز الإنسان في المستشفيات والعيادات.
3-الكشف عن الساركاريا في القواقع والميتاساركاريا في الخضراوات النيئة الطازجة.
4- استخدام تفاعل البلمرة المتسلسل للتعرف على الأنواع والتركيب الجيني للفاشيولا.
5- دراسة عوامل خطر الإصابة بداء المتورقات.
6- دراسة تأثير بعض المواد الكيميائية على حيوية القواقع والميتاساركاريا كطرق للمكافحة.
بلغت نسبة الإصابة بداء المتورقات (17.8٪) بين الحيوانات المذبوحة. قد يكون سبب هذه العدوى هو زيادة كتل الأراضي المروية في منطقة البحث وميل المزارعين ومربي الحيوانات إلى إطعام مواشيهم في مناطق المستنقعات والرطوبة خلف الحبوب بسبب نقص الأعلاف. نظرًا لأن المضيف الوسيط يفضل مناطق المستنقعات ذات المياه بطيئة الحركة والجداول الصغيرة، والتي توفر أيضًا رطوبة كافية للبقاء على قيد الحياة.
ووجدت أعلى نسبة إصابة في الجاموس 28٪ تلتها الأغنام 26.1٪، الأبقار 23.5٪، الماعز 19.2٪ والإبل 0٪. يمكن أن يعزى اختلاف الاصابة بين الحيوانات المذبوحة إلى أسلوب رعي الحيوانات، ولكن هذا الاختلاف لم يكن معنويا مع قيمة P> 0.05. كان الفاشيولا الكبدية هي النوع السائد 27 (52.9٪) (12 في الأغنام، 4 في الماعز، 9 في الأبقار و2 في الجاموس)، الفاشيولا العملاقة كانت 18 (35.3٪) (8 في الأغنام، 1 في الماعز، 4 في الأبقار و5 في الجاموس)، كانت الإصابة المختلطة 3 (5.9٪) في الأبقار واليرقات كانت 3 (5.9٪) في الأغنام شكليا.
بلغ معدل الإصابة بداء المتورقات في الأغنام 23/88 (26.1٪)، ووجدت أعلى نسبة إصابة في الذكور منها عن الإناث، وعند عمر أكثر من 3 سنوات، وكانت اعلي في الخريف يليه الربيع ثم الشتاء وأخيراً في الصيف، معظم الأغنام المصابة كانت تتبع نظام الرعي الحر وتقريبًا جميع الأغنام المصابة مذبوحة في المحلات التجارية بالقرى.
كان معدل الإصابة بداء المتورقات 5/26 (19.2٪) في الماعز التي تم فحصها وكان أعلى بين الماعز الأكبر سنًا > 3 سنوات، واعلي في الشتاء عن المواسم الأخرى، وبين الذكور أكثر من الإناث وفي الماعز التي ترعي بحرية (في الهواء الطلق) من الحيوانات المسكونة (داخل المنزل).
كان معدل الإصابة بداء المتورقات في الأبقار 16/68 (23.5٪) وكان أعلى في الإناث 5/18 (27.7٪) من الذكور 11/50 (22٪)، وأكثر في عمر> 4 سنوات 5/17 (29.4٪) عن عمر 2-4 سنوات 9/36 (25٪) وعمر1-2 سنوات 2/15 (13.33٪)، وفي موسم الأمطار مقارنة بالجفاف، وفي الشتاء 7/25 (28٪)، 4/18 (22.2٪) في الخريف و2/9 (22.2٪) في الصيف و3/16 (18.75٪) في الربيع. في نظام النطاق الحر (في الهواء الطلق) 13/53 (24.5٪) عن النظام المسكن (داخلي) 3/15 (20٪)، الحيوانات المصابة بها براز عجيني، وغشاء مخاطي شاحب، معطف خشن، ضعف و5 إناث مصابة لا تستجيب للحمل. الإصابة أكثر في شبين 3/12 (25٪) من بنها 9/37 (24.7٪) وطوخ 4/19 (21.05٪). كان معدل الإصابة أعلى في الأبقار المذبوحة في المحلات التجارية بالقري 14/29 (48.3٪) من تلك المذبوحة في المسالخ 2/39 (5.1٪).
كان معدل الإصابة بداء المتورقات في الجاموس 7/25 (28٪) وكان أعلى في الذكور 6/15 (40٪) من الإناث 1/10 (10٪)، وأكثر في عمر 2-4 سنوات 6/18 (33.3٪) عن عمر > 4 سنوات 1/7 (14.3٪)، وأكثر في الربيع 2/5 (40٪) من الشتاء 3/10 (30٪) والخريف 2/8 (25٪). كانت جميع الجاموس المصابة تتبع نظام النطاق الحر (خارجي) 7/11 (63.6٪)، والجاموس المصابة بها براز عجيني، وبعضها كان يعاني من ضعف. الإصابة أكثر في بنها 5/13 (38.5٪) من طوخ 2/6 (33.3٪). ذبحت جميع الجاموس المصابة في المحلات التجارية بالقرى.
كشفت الدراسة الحالية عن أنواع الفاشيولا التي تصيب الأغنام والماعز والأبقار والجاموس في القليوبية، مصر على شكل الفاشيولا الهجين.
تم الكشف عن التوصيف الجزيئي لأنواع المتورقات بناءً على التسلسل الجزئي لـ ITS2 rDNA وكشفت الدراسة أن الفاشيولا تكاد تتطابق مع التسلسلات من مضيفين متنوعين مع تلك الموجودة في التسلسلات المتوفرة السابقة. لقد ثبت أن شكل الفاشيولا الهجين موجود في القليوبية، مصر. كشفت المحاذاة أن نتيجتنا في عزل W7 (GenBank accession OP245094) كانت مطابقة نموذجية لتلك الموجودة في مصر (MT423006) ، (MW600275) ، (AJ853848) ، كينيا (MN970008)، نيجيريا (MN608173) ، تركيا (KY613944)، إيران (KF866247) ) ، ألمانيا (KF425321)، جنوب إفريقيا (MW793533)، بلجيكا (MW046876)، سويسرا (MK321643) واليابان (AB010976) بينما عزل W1 (GenBank accession OP245092) كان مطابقًا نموذجيًا للموجود في مصر (MT423007)، كينيا (MZ396929)، ليبيا (MT025519)، إيران (JF432071)، الهند (MZ413927)، فيتنام (MT429176)، المملكة العربية السعودية (MN559388)، إسبانيا (MG569979) والصين (MH385388).
أكد تحليل المحاذاة نتائجنا وكشف عن وجود تشابه بين عزلة واحدة (W1) مع عزلة الفاشيولا الكبدية على GenBank عند استخدام البلمرة المتسلسل بينما وجد اختلاف في الفاشيولا العملاقة وقد يكون بسبب وجود الهجينة في عزلاتنا، وقد تكون هذه النتيجة بسبب أن عزلتنا قد تم إدخالها مؤخرًا نسبيًا إلى محافظة القليوبية حيث إن هذه هي المرة الأولى التي أبلغت فيها عن هجين الفاشيولا في القليوبية.
كان حدوث داء المتورقات في الحيوانات الحية 20/406 (4.9٪) و27/30 (90٪) بالفحص المجهري والبلمرة المتسلسل على التوالي. كانت المتورقة الكبدية هي النوع السائد حيث أصيب 7/10 (70٪) من الأغنام بالفاشيولا الكبدية و 3/10 (30٪) مصابة بالعدوى المختلطة (الفاشيولا الكبدية و الفاشيولا العملاقة) بينما 5/8 (62.5٪) من الابقار مصابة بالفاشيولا الكبدية و 3/8 (37.5٪) مصابة بالعدوى المختلطة (الفاشيولا الكبدية و الفاشيولا العملاقة) بناءً على جين ITS2 rDNA الذي تضخم في 300pb علاوة على ذلك، جميع الماعز 3/3 (100٪) وجميع الجاموس 6/6 (100٪) مصابة بالفاشيولا الكبدية ، كان معدل الإصابة في الأغنام 9/154 (5.8٪) و 10/12 (83.3٪) ، 2/31 (6.4٪) و 3/4 (75٪) في الماعز ، 5/99 (5.1٪) و 8/8 (100٪) في الأبقار ، 4/52 (7.7٪) و 6/6 (100٪) في الجاموس و 0/70 (0٪) في الإبل بالفحص المجهري و البلمرة المتسلسل على التوالي وهذه النتائج لم تكن ذات قيمة معنوية عن طريق البلمرة المتسلسل أو الفحص المجهري بقيمة P> 0.05. كان معدل الإصابة أعلى في الجاموس يليه الماعز ثم الأغنام وأقل في الأبقار.
تم العثور على معدل إصابة أعلى في الذكور من الأغنام للإناث {3 من 32 (9.4٪) كانوا ذكور و6 من أصل 122 (4.9٪) كانوا إناث} علاوة على ذلك، كانت الإصابة أعلى في عمر 2-4 سنوات 8/128 (6.25٪) عن عمر سنتين 1/26 (3.8٪). تم العثور على أعلى إصابة في الشتاء 3/21 (14.3٪) يليه الربيع 2/33 (6.1٪) ثم الخريف 3/71 (4.2٪) وأخيراً في الصيف 1/29 (3.4٪). كانت الإصابة أعلى في طوخ 5/56 (8.9٪) ثم بنها 3/71 (4.2٪) وأخيراً في شبين 1/27 (3.7٪). كانت الأغنام المصابة تقريبًا تتميز بالرعي في المناطق المفتوحة وتعاني من الإسهال والضعف وخشونة الفراء وفقدان الشهية، وكان أحد الأغنام مصابًا بوذمة في البطن وشاحبة الغشاء المخاطي. وفقا لنتيجة Chi-square، فإن المكان، العمر، الجنس، الموسم، نظام التربية لم يؤثر بشكل كبير في حدوث داء المتورقات في الأغنام بقيمة P> 0.05.
فيما يتعلق بالنتيجة في الماعز، فإن جميع الماعز المصابة كانت إناث 2/21 (9.5٪) والاصابة اعلي في عمر (2-4 سنوات). ووجدت الإصابة في الخريف 2/16 (12.5٪) وجميع الماعز المصابة ترعى وكانت من طوخ. طبقاً لنتيجة Chi-square، أثر العمر تأثيراً معنوياً على حدوث داء المتورقات في الماعز بقيمة P تساوي 0.04. على العكس من ذلك، فإن الموقع والجنس والموسم ونظام التربية لم يؤثر معنويا عند حدوث داء المتورقات بقيمة P> 0.05. فيما يتعلق بالنتيجة في الأبقار، كان 3 من 55 (5.5٪) إناث و2 من 44 (4.5٪) ذكور. علاوة على ذلك، كان 3 من 39 (7.7٪) بالغين و2 من 60 (3.3٪) من الأبقار الصغيرة، وكانت الإصابة أعلى في الشتاء 3/37 (8.1٪) يليه الربيع 1/14 (7.1٪) والخريف 1 / 31 (3.2٪) وأعلى في بنها 2/25 (8٪) من طوخ 3/53 (5.7٪) وجميع الماشية ترعي في الاماكن المفتوحة. وفقًا لنتيجة Chi-square، فإن نظام التربية قد أثر بشكل كبير على حدوث داء المتورقات في الابقار حيث كانت جميع الأبقار المصابة ترعي (في الهواء الطلق) بقيمة > 0.05.
في دراستنا باستخدام تحليل تسلسل الانفجار والتمايز النشئي المستند إلى الاحتمالية القصوى لعزلات الفاشيولا المختلفة في برنامج MEGA 6.0، لم يتم العثور على أي اختلاف بين عزلات الفاشيولا في الحيوانات والبشر وتم تشبيه جميع الأنواع. كشف التسلسل أن نتيجتنا مع (GenBank accession OP245092) كانت مطابقة عادةً لتلك الموجودة في مصر (MT423007)، كينيا (MZ396929)، ليبيا (MT025519)، إيران (JF432071)، الهند (MZ413927)، فيتنام (MT429176)، السعودية شبه الجزيرة العربية (MN559388) وإسبانيا (MG569979) والصين (MH385388).
وأما نتيجتنا في الإبل، فقد كانت 0/70 (0٪) وقد يُعزى ذلك إلى عدم رعي الإبل كما في المجترات الصغيرة والكبيرة، والتي لا توجد أيضًا في القطعان.
كان حدوث داء المتورقات في الإنسان 7/179 (3.9٪) و9/17 (52.9٪) بتقنية الترسيب وتقنية تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدية التي تستخدم لتحديد الأنواع على التوالي. كان النوع السائد هو المتورقة الكبدية، حيث أصيب 8/9 (88.9٪) من الحالات البشرية بالفاشيولا الكبدية بينما 1/9 (11.1٪) مصابة بالعدوى المختلطة (الفاشيولا الكبدية والفاشيولا العملاقة) بناءً على جين ITS2 rDNA الذي تضخيمه في 300pb. واعتبر الفاشيولا الكبدية أكثر الأنواع التي تصيب البشر شيوعًا.
تم العثور على معدل إصابة أعلى في طوخ 4/73 (5.5٪) من بنها 2/56 (3.6٪) وشبين 1/50 (2٪)، وقد يرجع ذلك إلى ارتفاع عدد البشر الذين تم جمعهم من طوخ، وهذا المعدل ليس معنويًا بقيمة P> 0.05. وفقًا للعمر، كان المعدل الأعلى أكبر في العمر> 30 عامًا 6/105 (5.7٪) بينما كان 1/22 (4.5٪) في العمر 16-30 عامًا و0/52 (0٪) في العمر أقل من 15 عامًا، وهذا المعدل لم يكن معنويا مع قيمة P> 0.05. ويمكن أن يعزى ذلك إلى أن هذا العمر أكثر تعرضًا للعدوى، وأكثر احتكاكًا بالحيوانات والأعشاب وانخفاض المناعة مقارنة بعمر 16-30 عامًا وعمرأقل من 15 عامًا. كان معدل الإصابة عند الإناث 4/111 (3.6٪) والذكور 3/68 (4.4٪)، وهذا يشير إلى إصابة الذكور أكثر من الإناث، ولكن هذا المعدل لم يكن معنوياً مع قيمة P> 0.05. ويمكن أن يعزى ذلك إلى أن الذكور أكثر تعرضًا للعدوى حيث يزداد احتكاكهم بالحيوانات والأعشاب والعمل في المناطق الزراعية.
فيما يتعلق بالموسم، مثل فصل الشتاء أعلى معدل 5/99 (5.1٪) يليه الربيع 1/26 (3.8٪) ثم الخريف 1/37 (2.7٪) ولكن لم يتم العثور على حالات في الصيف 0/17 (0٪)، قد يعزى ذلك إلى زيادة هطول الأمطار وانخفاض درجة الحرارة والأجسام المائية التي تزيد من أعداد القواقع والمراحل المعدية. لكن المعدل لم يكن معنويا مع قيمة P> 0.05. تنتمي جميع الحالات الإيجابية إلى المناطق الريفية حيث يكونون أكثر احتكاكًا بالمياه الملوثة والأعشاب والحيوانات وسوء النظافة وتاريخ تناول الخضار النيئة دون غسلها وكان هذا معنويا بقيمة P <0.05.
وبحسب المهن، سجلت أعلى إصابة في الأشخاص أصحاب الأشغال اليدوية 1/10 (10٪) يليهم رعاة الأغنام 1/13 (7.7٪) ثم المزارعون 2/41 (4.9٪) وآخر إصابة كانت لدى ربات البيوت 3 / 87 (3.4٪). ويعاني معظم المصابين من آلام في البطن والظهر وضعف عام وحمى وإسهال متناوب مع إمساك وغثيان وقيء وبعض الاستسقاء ويرقان وحكة حول الشرج وفيروس سي وتشمع الكبد وخراج كبدي.
يزداد معدل موت القواقع الحلزونية مع تلف عند سطح القدم عند استخدام الصوديوم هيبوكلوريد لعلاج قواقع الفاشيولا لتقليل خطر الإصابة بها. في حين أن معظم هيبوكلوريد الصوديوم في الماء يتحلل إلى هيدروكسيد الصوديوم وحمض هيبوكلوروس، فإن هيبوكلوريدالصوديوم المتبقي يتفكك تمامًا في كاتيون الصوديوم Na + وأنيون هيبوكلوريد CIO-. يعمل حمض هيبوكلوروس كمذيب عند ملامسته للأنسجة العضوية، مما ينتج الكلور الذي يتفاعل مع مجموعة البروتينات الأمينية لتكوين الكلورامين، الذي يعطل عملية التمثيل الغذائي الخلوي. علاوة على ذلك، يقلل هيبوكلوريد الصوديوم من التوتر السطحي للمحلول المتبقي من خلال العمل كمذيب عضوي ودهني يكسر الأحماض الدهنية إلى أملاح الأحماض الدهنية (الصابون) والجلسرين (الكحول)، بالإضافة إلى الأحماض الدهنية الأخرى. بالإضافة إلى ذلك، يقلل هيبوكلوريدالصوديوم من الرقم الهيدروجيني عن طريق تحييد الأحماض الأمينية، مما يؤدي إلى تكوين الماء والملح وتدفق أيونات الهيدروكسيل.
أظهرت البيانات الحالية أن تركيز 10 جزء في المليون من NaOCL له تأثير مميت بعد 3 أيام من الحضانة ووصل إلى 9/10. لم يعش أي من القواقع المعالجة بعد 4 أيام، كما ماتت الساركاريا الموجودة بداخلها. كان لتركيزات 20 و30 و40 و50 جزء في المليون تأثير مميت بعد 30 دقيقة من الحضانة تتراوح من 3/10 إلى 7/10. لم ينج أي من القواقع المعالجة بعد 3 أيام بتركيزات 40 و50 جزء في المليون وبعد 4 أيام بتركيز 20 و30 جزء في المليون كما مات السر كاريا الموجودة بداخلها. وأظهرت الحلزونات النافقة أضرارا بالغة على سطح القدم يمكن رؤيتها بالعين المجردة. في دراستنا، كان لتركيزات 60 و70 جزء في المليون تأثير مميت 8/10 بعد 30 دقيقة ولم ينج أي من القواقع المعالجة بعد 24 ساعة، ومع ذلك عند تركيز 80 جزء في المليون، ماتت جميع القواقع (10/10).
بخصوص تأثير المياه الجارية على فصل الميتاسركاريا المحصنة عن الخس والجرجير. أظهرت نتائجنا أنه بعد 5 دقائق، تم فصل 1.33٪ و3٪ الميتاسركاريا في الجرجير والخس على التوالي، بينما تم فصل 2.66٪ و5.33٪ بعد 10 دقائق. يشير هذا إلى أن غسل الخضار النيئة بالماء الجاري لمدة 5 إلى 10 دقائق ينجح في فصل بعض الميتاسركاريا ولكن لا يعتبر طريقة مناسبة.
فيما يتعلق بتأثير حامض الستريك على انفصال المتورقة الميتاسركاريا المستخدمة بتراكيز تتراوح من 2 إلى 10 ملجم / لتر لمدة 5-10 دقائق. تم فصل جميع الميتاسركاريا بتركيز 10 مجم / لتر لمدة 10 دقائق. يأخذ الكيس غير المنفصل والمنفصل لونًا ورديًا فاتحًا عند تلوينه باللون الأحمر الطبيعي، بدون جدار كيس مكسور وجميعها لها قدرة على الحركة تشير إلى جدوى الميتاسركاريا بعد معالجتها بحمض الستريك. لذلك، نجح حامض الستريك في فصل الميتاسركاريا ولكن ليس قتلها.
فيما يتعلق بتأثير الخل التجاري (حمض الأسيتيك) على فصل المتورقة الميتاسركاريا، المستخدم بتركيزات 40 إلى 120 مل / لتر. تم فصل جميع الميتاسركاريا بتركيز 120 مل / لتر لمدة 5 و10 دقائق. ومع ذلك، فإن حامض الخليك لا يؤثر على صلاحيةالميتاسركاريا.
تأثير برمنجنات البوتاسيوم على انفصال الميتاسركاريا بتركيزات تتراوح من 4 إلى 24 مجم / لتر لمدة 5-10 دقائق. تم فصل جميع الميتاسركاريا بتركيز 24 مجم / لتر لمدة 10 دقائق. ومع ذلك، (2 من 30 ميتاسركاريا) 6.7 ٪ من هذا الميتاسركاريا المنفصل ظل قابلاً للحياة (له لون أرجواني وحركة) بينما ظهر الباقي ككتل داكنة بدون بنية نموذجية. بتركيزات من 4 إلى 20 ملجم / لتر لمدة 5 أو 10 دقائق، فإن جميع الكيسات غير المنفصلة والمنفصلة تأخذ لونًا أرجوانيًا دون كسر جدار الكيس وحركة نشطة طفيفة.
النتائج السابقة، اوضحت ان برمنجنات البوتاسيوم عند 24 ملجم / لتر تعتبر الأداة الأكثر فائدة لفصل وقتل الميتاسركاريا الملحقة بالخضروات المستخدمة في السلطة، في وقت قصير من 5 إلى 10 دقائق، دون تليين الأوراق أو تغيير اللون. ومع ذلك، كانت هناك حاجة إلى مزيد من أوقات الغسيل لإزالة اللون الأرجواني من الخضار المعرضة لبرمنجنات البوتاسيوم.