Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Validation of one step PCR for diagnosis of some viruses among farm animals /
المؤلف
Abd Elmonem, Gawhara Gamal Eldin Ahmed.
هيئة الاعداد
باحث / جوهرة جمال الدين أحمد عبدالمنعم
مشرف / سعد شعراوى على شعراوى
مشرف / أحمد رفعت حبشى
مناقش / سعد شعراوى على شعراوى
الموضوع
Communicable diseases. Domestication. Human-animal relationships.
تاريخ النشر
2022.
عدد الصفحات
80 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
Veterinary (miscellaneous)
تاريخ الإجازة
1/1/2022
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية الطب البيطري - الفيرولوجى
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 96

from 96

Abstract

تفرض الأمراض المعدية التكاليف الاقتصادية من خلال زيادة معدلات الإصابة بالأمراض والنفوق وخفض الإنتاج (الحليب واللحوم والصوف وما إلى ذلك) ، وتقليل معدل تحويل العلف ، مما يقلل من زيادة الوزن ، ويقلل من قوة الجر ، ويقلل من الخصوبة. بالإضافة إلى ذلك ، فإن العبء المالي ناتج عن قيمة الرعاية ، ونفقات الإجهاض ، والآثار على هجرة الماشية المحلية ، والاصول الوراثية ، والتجارة العالمية. يعتبر مرض الحمى القلاعية و مرض الاسهال البقرى الفيروسى و مرض اللسان الازرق و تسمم الدم النزفى ضمن قائمة الامراض التى يجب الابلاغ عنها طبقا للمنظمة العالمية للصحة الحيوانية (OIE) وللتحرك نحو القضاء على هذه الأمراض ، من الضروري تحسين المراقبة والتحقيق ، وتوافر التشخيص السريع والدقيق.
فى هذه الدراسة تم اعتماد اختبار التفاعل المتسلسل المتعدد الجديد والتحقق من صحته للكشف عن العدوى الفردية والمختلطة بالحمى القلاعية ومرض الاسهال البقرى الفيروسى و مرض اللسان الازرق و تسمم الدم النزفى في الماشية. تم تحسين الاختبار من خلال اختبار درجات حرارة التلدين المختلفة (Ta) ، وتركيزات البادئ ، وأوقات التمديد ، وعدد الدورات. تم استخدام السلالات المحلية من مسببات الأمراض المستهدفة لتقييم خصوصية الفحص وحساسيته. واظهر تطبيق اختبار التفاعل المتسلسل المتعدد الجديد على عينات حقلية (دم و نسيج حويصلى ظاهرى) (عدد = 36) تم جمعها من الحيوانات المشتبه في إصابتها بمسببات الأمراض المستهدفة أن هذا الاختبار كان محددًا وحساسًا بدرجة كافية لاكتشاف مسببات الأمراض الأربعة كعدوى مفردة أو مختلطة. حيث تم تسجيل الاصابة المختلطة لمرض الحمى القلاعية مع باستوريلا مولتوسيدا في 11 حيوان (42٪) بينما سجلت الاصابة الأحادية بمرض الحمى القلاعية في 5 حيوانات (19.2٪). وسجلت الاصابة الأحادية لمرض الإسهال الفيروسي البقري في 5 حيوانات (19.2٪) واصابة مزدوجة مع مرض الحمى القلاعية في حيوان واحد (3.8٪). والجدير بالذكر أن مرض اللسان الأزرق لم يتم اكتشافه في أي من العينات السريرية. اوضح تحليل النتائج من خلال الأدوات الإحصائية OR و RR أن حالات الإصابة المشتركة بفيروس الحمى القلاعية مع فيروس الاسهال البقرى كانت أقل احتمالًا 20 مرة من حالات عدوى الفردية بفيروس الحمى القلاعية ، في حين أن الإصابة المشتركة بفيروس الحمى القلاعية مع مع باستوريلا مولتوسيدا كانت أكثر تكرارا من حالات العدوى الفردية بفيروس الحمى القلاعية.
يهدف الجانب الآخر من الدراسة إلى فحص سلالات فيروس الحمى القلاعية المنتشرة في الدلتا خلال الفترة 2019-2020. اظهرالفحص السريع للعينات التي تم جمعها (ن = 36) من ثلاث محافظات (الشرقية والقليوبية والغربية) عن طريق تفاعل البلمرة المتسلسل حقيقى الوقت أن 31 عينة (21 دم و 10 نسيج ظاهرى) (86٪) كانت إيجابية. من ناحية أخرى ، تم الكشف عن 29 عينة (80.5٪) فقط بواسطة اختبار الاليزا الخاصة بكشف النمط المصلى. تم اكتشاف النمط المصلي A في 12 عينة (33.3٪) ، والنمط المصلي SAT2 في 11 عينة (30.5٪) والنمط المصلي O في 6 عينات (16.6٪). لم يتم اكتشاف النمط المصلي SAT1 في أي عينات.
تم عزل عشر عينات من النسيج الظاهرى الحويصلي التي أظهرت نتائج إيجابية مع اختبار تفاعل البلمرة المتسلسل حقيقى الوقت بقيمة حد الدورة أقل من 30 على خلايا كلى من الهامستر. أنتجت العينات تأثير الاعتلال الخلوي المميز على الخلايا بعد 24-48 ساعة )إستدارة الخلايا ، والتنكس ، والحبيبات السيتوبلازمية ( متبوعة بالتحلل الكلي للخلايا. اوضح التصنيف الجزيئي لهذه العزلات بواسطة تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي مع بادئات محددة للأنماط المصلية و مستندة للبروتين الفيروسى 1. أوضحت أن الأنماط المصلية A و O و SAT2 قد تم تحديدها في 5 و 3 و 2 عزلات على التوالي.
يشير التسلسل والتحليل الوراثي لأربع عزلات من مرض الحمى القلاعية إلى أن معزولتين من النمط المصلي A تنتمي إلى A-Iran 05 من النمط العلوي الآسيوي و الذى ظهر لاول مرة فى مصر خلال عام 2010 ويختلف بشكل واضح عن النمط الجيني لأفريقيا السابع وهو كان المسئول عن الوباء الذى حدث خلال عام 2006. و تقع هذه المعزولات فى نفس المجموعة التى تنتمى تم اليها سلالة اللقاح A / EGY 1/2012 بنسبة تماثل 99.42 و 99.57٪ على التوالي. بينما تنتمى المعزولة الثالثة من النمط المصلي A الى النمط الجيني الرابع من النمط العلوي الأفريقي الذي تم الإبلاغ عنه لأول مرة خلال عام 2012 وتم توثيقه في بعض الموجات الوبائية خلال عامي 2016 و 2018 ، مما يدل على الاختلاف الواضح بينها وبين سلالة اللقاح A / EGY 1/2012 بنسبة تماثل 85.65٪ بينما اظهرت تشابهًا مع سلالات معزوله سابقًا فى السودان في عام 2018 بنسبة تماثل (92.74٪ -92.11) وسلالات إثيوبية معزوله في عام 2015 بنسبة تماثل (93.38٪).أما المعزولة الرابعة فكانت من النمط المصلي SAT2 ، والنمط العلوي VII ، وسلالة Lib-12 ، والتي تعتبر سلالة جديدة. أظهرت النتائج أن المعزولة مختلفة وراثيًا عن سلالة اللقاح المستخدمة EGY / H1Ghb / 2012 بنسبة 13.4 بالمائة وكانت وثيقة الصلة ب (SAT2 / Lib-12) بنسبة تماثل جنى تصل الى 96.9٪ .
تشير نتائج الدراسة إلى ظهور سلالات جديدة تؤكد الحاجة إلى المراقبة المستمرة للأنماط المصلية لمرض الحمى القلاعية المتداولة وستعزز الاهتمام بدراسات مطابقة اللقاحات الإضافية لبدء برنامج تحصين ناجح ضد مرض الحمى القلاعية في مصر.