Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Isolation and characterization of bacteriophages infecting proteus spp. Isolated from benha university hospital /
المؤلف
Khafaga, Esraa Mohamed Abdelfatah Ali.
هيئة الاعداد
باحث / إسراء محمد عبدالفتاح علي خفاجة
مشرف / صباح أبوالمعاطى أحمد
مشرف / مرفت جميل حسن حسن
مشرف / أحمد إسماعيل محمد الهادى
الموضوع
Medical bacteriology.
تاريخ النشر
2021.
عدد الصفحات
108 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
علوم النبات
تاريخ الإجازة
1/1/2021
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية العلوم - كيمياء
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 139

from 139

Abstract

بكتريا البروتيس هي بكتريا ممرضه انتهازيه وهي بكتريا سالبه الجرام وتسبب عديد من الاصابات التي تختص بالانسان. وتعتبر واحده من اشهر الاسباب التي تصيب القسطره المتواجده في الجهاز البولي .بالاضافه الي انها تسبب الالتهاب السحائي في الاطفال وتسبب ايضا التهابات الجروح والروماتيزم. بالاضافه الي قدرتها علي تكوين الاغشيه الحيويه والمعروف عن هذه الاغشيه مقاومتها الشديده للمضادات الحيويه بالمقارنه مع البكترياالمفرده.
وفي الاونه الاخيره تطورت مقاومه البكتريا للمجموعات المختلفه من المضادات الحيويه. واصبحت المقاومه للمضادات الحيويه من المخاطر الرئيسيه للصحه العالميه. وفي هذه الدراسه اظهرت عزلات بكتريا البروتيس (Proteus mirabilis) مقاومه كبيره لسته عشر نوعا من المضادات الحيويه، والذي يجعل من هذه البكتريا مقاومه للمضادات الحيويه المتعدده (MDR) . ولذلك قام الباحثون من مختلف انحاءالعالم بدراسه كفاءه البكتريوفاجات كبديل للمضادات الحيويه للتغلب علي البكتريا وبخاصه البكتريا المقاومه للمضادات الحيويه .
ان هذه الدراسه تهدف الي عزل وتوصيف البكتريوفاجات وذلك للسيطره علي البكتريا المقاومه للمضادات الحيويه وبخاصه التي لديها القدره علي تكوين اغشيه. خمسة عزلات من بكتريا البروتيس تم تعريفها كيميائيا ومورفولوجيا ولزياده التأكيد تم تعريفها باستخدام جهاز (VITEK 2) .
تم اختبار ستة عشر نوع من المضادات الحيويه ينتمون لمجموعات مختلفه ضد الخمسة عزلات البكتريه. واوضحت العزلات مقاومه شديده لهذه المضادات. كما اظهرت هذه العزلات قدره كبيره علي تكوين اغشيه حيويه . وللتغلب علي هذه المشكله تم عزل وتوصيف ثلاثه بكتريوفاجات وتم تسميتهم .(vB_PmiM-ES1a, vB_PmiM-ES1b and vB_PmiM-ES1c)
وظهرت هذه البكتريوفاجات علي هيئه بلاكات صغيره واضحه وبقطر صغير يتراوح بين واحد الي اثنين ميلي متر. ولتوصيف اكثر لهذه البكتريوفاجات تم تصويرها بالميكروسكوب الالكتروني وأوضح أنهم ينتمون الي عائله Myoviridea . تم عمل اختبارات فزيائيه وكيميائيه علي الثلاثه فاجات وذلك لاختبار قدرتهم علي تحمل الظروف المختلفه مثل درجه الحراره والأس الهيدروجيني. واظهرت هذه الفاجات تحمل كبير لدرجات الحراره المختلفه مثل (10, 25, 37, 50, 60)℃ بالاضافه الي ان هذه الفاجات اظهرت مقاومه كبيره لاختلاف حامضيه وقاعديه الوسط مثل (3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11). وقد تم معرفة المدي العوائلي للفاجات الثلاثه مفرده والخليط من هذه الفاجات وذلك باختبارهم علي اثنين وعشرون نوع من البكتريا . واظهر خليط الفاجات مدي عوائلي اكبر من الفاجات المفرده.
وقد اظهر منحني النمو للثلاثه فاجات vB_PmiM-ES1a, vB_PmiM-ES1b و vB_PmiM-ES1c ان حجم انفجار الخليه الاول كان (99.6, 95 and 86 PFUs/cell,) بالتتابع. والذي بدأ بعد 15 دقيقه. وقد اظهرت البكتريوفاجات تركيب بروتيني مختلف باستخدام انزيمات مختلفه وكان حجم الجينوم للفاجات (vB_PmiM-ES1a, vB_PmiM-ES1b and vB_PmiM-ES1c) بالتتابع هو .(59.39 kb, 62.19 kb and 52.07 kb)
ولقد تم حساب القدره علي تحليل الغشاء الحيوي باستخدام خليط من البكتريوفاجات وكانت قدره البكتريوفاجات علي منع تكوين الغشاء الحيوي هي 44.40% و 56.26% وذلك عند استخدام تركيزات من خليط الفاجات تصل الي 108 PFU/ml and 109 PFU/mlبالتتابع.
وتم معرفه القدره علي تحليل كل فاج لبكتريا P. mirabilis EG-ES1باستخدام نسب مختلفه من البكتريوفاجات والبكتريا معا تسمي (MOI).وقد اظهرت الفاجات ان عند استخدمها بتركيزات عاليه من MOIأنها كانت كافيه لاصابة البكتريا وتقليل من اعادة نمو البكتريا مره اخري . ولذلك استخدام ودخول هذه البكتريوفاجات في العلاج ممكن ان يصبح بديل واعد عن استخدام المضادات الحيويه.
ان هذه الدراسه اوضحت قدره خليط البكتريوفاجات للسيطره وازالة الاصابات المرتبطه بالاغشيه الحيويه الحادثه بواسطه بكتريا البروتيس المقاومه للمضادات الحيويه ولذلك ينصح وبشده استخدام البكتريوفاجات كعلاج بديل في مثل هذه الحالات .