Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Rapid detection of virulence associated genes in avian pathogenic e. coli with multiplex pcr /
المؤلف
Abd El-Galil, Noha Mohamed.
هيئة الاعداد
باحث / نهي محمد عبدالجليل
مشرف / أشرف عواد عبدالتواب
مناقش / أحمد محمد أحمد عمار
مناقش / مختار عبدالحكيم عبدالعزيز
الموضوع
Poultry Diseases.
تاريخ النشر
2016.
عدد الصفحات
185 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
الدكتوراه
التخصص
Veterinary (miscellaneous)
تاريخ الإجازة
01/01/2016
مكان الإجازة
جامعة بنها - كلية الطب البيطري - البكتيريا والمناعة والفطريات
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 185

from 185

Abstract

تعد الإصابة بميكروب الاشيرشياكولاي من المشكلات الخطيرة التي تواجه صناعة الدواجن ولهذا السبب استمرت دراسة الامراض التي يسببها هذا الميكروب لفترات طويلة . وحديثا تم ملاحظة خطورة انتقال عدوي الاشيرشياكولاي الي الانسان وكذلك ظهور السلالات المقاومة للعديد من المضادات الحيوية.
ولذا استهدفت الدراسة القاء الضوء علي بعض عوامل الضراوة التي تلعب دورا هاما في حدوث الإصابة وكذلك نسبة تواجد السلالات المقاومة للعديد من المضات الحيوية.
ولتحقيق هذا الهدف تم تجميع عدد 451 عينة من انسجة الرئتين, القصبة الهوائية, الكبد, القلب والطحال مأخوذة من الدجاج المصاب وتم أجراء الاختبارات البكتريولوجية علي الميكروب, التوصيف المظهري لانماط المعزولات المقاومة للمضادات البكتيرية, التحليل الفيلوجيني للعترات المعزولة والكشف عن وجود بعض جينات الضراوة الهامة في احداث العدوي وكذلك اجراء اختبار التتابع النيوكليوتيدي لاثنين من الجينات تحت الدراسة لمعرفة مدي التجانس بين هذه الجينات المتواجدة في ميكروب الاشيرشياكولاي ونفسها في ميكروبات اخري او في الانسان.
وبالنظر لنسبة عزل الميكروب, أظهرت النتائج ان 236 عينة كانت ايجابية لتواجد الاشيرشياكولاي بنسبة عزل 52%. وكانت أعلي نسبة للعزل من الرئتين (64%) ثم من القصبة الهوائية, الكبد, القلب وأخيرا الطحال بالنسب 52%, 51%, 48% و 41% علي التوالي.
تم استخدام نظام RapID ONE كبروتوكول حديث وفعال للتصنيف البيوكيميائي لـ 15 عترة تم اختيارها عشوائيا وقد جاءت النتائج متطابقة مع نتائج التصنيف البيوكيميائي بالطرق التقليدية واسفرت النتائج عن أكواد مختلفة لكل منها سبعة أرقام.
وبالتحليل السيرولوجي لعدد 25 عينة أوضحت النتائج أن العترات من نوع O78 هي الاكثر انتشارا بين المعزولات بنسبة 20% وتليها العترات من نوع O157, O27 بنسبة 16% لكل منهما وكانت نسبة تواجد O168, O125 هي 12% لكل منهما وأخيرا O115 بنسبة 8% بالاضافة الي 4 عترات غير مصنفة.
كما تمت دراسة عترات الإشيرشياكولاى التى تم الحصول عليها لقابليتها لأنماط من المضادات البكتيرية المختلفة بطريقة إنتشار القرص, وقد أظهرت النتائج أنه كانت هناك مقاومة مطلقة للإريثرومايسين و الريفامبيسين وكذلك لوحظ وجود مقاومة عالية للسيبروفلوكساسين (95%) والسلفا مع التراى ميثوبريم (93%) والسيفوكستين (85% ) و 83% من المعزولات أظهرت مقاومة للكلورامفينيكول, 80% للدوكسيسيكلين و75% للاموكسيسيللين مع الكلافيولينك اسيد, بينما كانت 60% من المعزولات حساسة للجنتاميسين ثم الكولستين بنسبة (55%).
في هذه الدراسة تم استخدام أنزيم البلمرة المتسلسل المتعدد للكشف عن وجود سبعة من جينات الضراوة الخاصة بميكروب الاشيرشيا كولاي في 15 عترة من لعترات المعزولة بينما تم استخدام انزيم البلمرة المتسلسل الاحادي في الكشف عن اربعة جينات أخري وقد أظهرت النتائج ان ompA هو الجين الاكثر تواجدا في العترات فقد تواجد في 14 من المعزولات ثم جين iss الذي تواجد في 13 عينة بينما تواجدت جينات الiutA , traT في 12 عينة لكل منهما. وتواجد جين cvaC في 9 معزولات و 2stx في 7 معزولات وكانت جينات ibeA, , eae و 1stx هي الاقل انتشارا فقد تواجدت في معزولة واحدة فقط لكل منها بينما لم يتواجد جين الـ hly في اي من المعزولات.
وبإجراء اختبار التتابع النيوكليوتيدي لاثنين من الجينات التي تم الكشف عنها وهي iss وcvaC أظهرت النتائج وجود تماثل بين هذه الجينات التي تمت دراستها في هذا البحث ونفس هذه الجينات في سلالات أخري من الاشيرشياكولاي والتي تم رفعها في بنك الجينات .
يمثل تواجد بعض الجينات التي تم الكشف عنها في هذه الدراسة والمحمولة علي البلازميد خطورة شديدة بسبب امكانية انتقالها الي ميكروبات أخري و الي الانسان .