الفهرس 
المقدمةيوجد فقط 14 صفحة متاحة للعرض العام
 |  | from | 88 |  |  |
| | | from | 88 | | |
المستخلص
إستهدفت هذه الدراسة تقييم إضافة الأنسولين بمستويات مختلفة (صفر , 5 , 10 , 15 ميكروجرام / مل ) إلـــــى بيئة الإنضـــــــــــــاج المعملــــــــــــي مع أو بدون إضــــــــافة هرمونات خارجيــــــــــــــــــــة (FSH, LH, E17β) وتأثير ذلك على عملية الإنضاج المعملى لبويضات الأرانب وتطور الأجنة اللاحق. استخدم فى هذه الدراسة 30 أنثى أرنب نيوزيلاندي أبيض (متوسط عمر 5,5 – 6 شهر ومتوسط وزن حى 2,5 - 3 كجم) كأمهات معطيه للبويضات.
بعد الذبح تم إسترداد البويضات من مبايض الإناث المذبوحة بطريقة التشريح. وإستخدمت كل البويضات ذات السيتوبلازم المتماثل والمتجانس فى عملية الإنضاج المعملى. وتم إستخدام بيئة زراعة الأنسجة 199 المضاف إليها 6% ألبيومين سيرم الأبقار فى عملية الإنضاج المعملى.
استخدمت ثمانية أنواع من بيئة زراعة الأنسجة أربعة منها مع إضافة الهرمونات الخارجية والأربعة الآخرى بدون اضافة الهرمونات الخارجية مع اضافة أربع مستويات من هرمون الانسولين (صفر , 5 , 10, 15ميكروجرام /مل) فى كل منها.
تم تثبيت البويضات وصبغها بعد 18 ساعة من الإنضاج المعملى على درجة حرارة 38,5 م و5% ثانى أكسيد كربون وذلك لمعرفة مرحلة النضج النووى. وتم إخصاب البويضات بعد عملية الإنضاج المعملى فى البيئات المختلفة وإستزراعها لمدة 72 ساعة وذلك لدراسة التطور المعملى اللاحق للأجنة والتى إشتملت على عملية الإنقسام وعملية تكوين البلاستوسيست.
وكانت أهم النتائج المتحصل عليها:
أولأً: عملية الإنضاج المعملى:
أظهرت النتائج وجود فروق معنوية فى مراحل النضج النووى بإضافة الأنسولين إلي بيئة الإنضاج المعملي لبويضات الأرانب فى كل من الطور الإستوائى الأول والطور الإستوائى الثانى ومجموع كل من الطور النهائى الأول +الطور الإستوائى الثانى وذلك بالمقارنة بالمجموعة القياسية. وكانت أعلى زيادة فى معدل الإنضاج (الطور النهائى الأول + الطور الإستوائى الثانى) عند إضافة 5 ميكرو جرام أنسولين/مل إلى بيئة الإنضاج يليها إضافة الأنسولين بتركيز (10 ، 15 ميكرو جرام/مل) حيث كانت 53,1 ، 50,5 % على التوالى وذلك مقارنة بالمجموعة القياسية 41,9% .
أوضحت النتائج عدم وجود تأثير معنوى لإضافة الهرمونات FSH , LH , E2 إلى بيئة الإنضاج المعملى على معدل الإنضاج النووى لبويضات الأرانب (البويضات التى وصلت لمرحلة الطور النهائى الأول + الطور الإستوائى الثانى).
لوحظ وجود فروق معنوية بين التركيزات المختلفة للأنسولين على معدل الإنضاج المعملى لبويضات الأرانب المنضجة فى البيئة المحتوية على الهرمونات مقارنة بالبيئة القياسية غير المحتوية على الانسولين. وكان أعلى معدل إنضاج عند إضافة الأنسولين بمعدل 5 ميكروجرام/ مل إلى بيئة الإنضاج(58,7%) يليه تركيز 10 ميكرو جرام (52,07%). ولم يكن هناك فرق معنوي فى نسبة البويضات التى وصلت لمرحلة النضج بين كل من المجموعة القياسية والمجموعة التى أضيف إليها الأنسولين بتركيز 15 ميكروجرام/مل.
تظهر النتائج وجود فروق معنوية بين التركيزات المختلفة للأنسولين على معدل الإنضاج المعملى لبويضات الأرانب الناضجة فى بيئة غير محتوية على الهرمونات مقارنة بالبيئة القياسية غير المحتوية على الانسولين. وكان أعلى معدل إنضاج عند إضافة الأنسولين بمعدل 5 ميكروجرام/ مل إلى بيئة الإنضاج(58,6%) يليه تركيز 15 ميكرو جرام (54,63%) ثم تركيز 10 ميكروجرام/مل (54,1) مقارنة بالبيئة القياسية (37,57%).
ثانياً: عملية الإستزراع المعملى:
أوضحت النتائج وجود فروق معنوية بين المعاملات أثناء عملية الإستزراع المعملى حيث أدت إضافة الأنسولين بتركيزاته المختلفة إلى تحسن معنوى فى كل من معدل الإنقسام ومعدل تكون البلاستوسيست وذلك بالمقارنة بالمجموعة القياسية غير المحتوية على الأنسولين. وكانت أفضل النتائج عند إضافة الأنسولين بتركيز 10 ميكروجرام/مل إلى بيئة الإنضاج.
ظهر من النتائج المتحصل عليها وجود فروق معنوية فى معدل الإنقسام لبويضات الأرانب حيث كان معدل الإنقسام أعلى للبويضات الناضجة فى بيئة غير محتوية على الهرمونات مقارنة بالبيئة المحتوية على الهرمونات. ولم يكن هناك فروق معنوية فى معدل تكون البلاستوسيست بالنسبة للبويضات المنضجة مع أو بدون إضافة الهرمونات.
تظهر النتائج وجود فروق معنوية فى معدل تكون البلاستوسيست حيث أدت إضافة الأنسولين إلى تحسن معدل تكون البلاستوسيست مقارنة بالبيئة القياسية (غير المحتوية على الأنسولين). بينما لم تظهر فروق معنوية بين التركيزات المختلفة للأنسولين وتأثيرها على معدل الإنقسام المعملى لبويضات الأرانب الناضجة فى البيئة المحتوية على الهرمونات ولكنها كانت أعلى فى البويضات المضاف إليها الأنسولين مقارنة بالبيئة القياسية (غير المحتوية على الأنسولين).
كان هناك تحسن معنوى فى كل من معدل الإنقسام ومعدل تكون البلاستوسيست نتيجة إضافة الأنسولين بالتركيزات المختلفة إلى بيئة الإنضاج المعملى لبويضات الأرانب غير المحتوية على الهرمونات مقارنة بالبيئة القياسية (غير المحتوية على الأنسولين) وكانت أفضل النتائج عند إضافة الأنسولين بتركيز 10 ميكروجرام/مل إلى بيئة الإنضاج.
الخلاصة:
نستنتج من هذه الدراسة أن إضافة الأنسولين إلى بيئة الإستزراع المعملي مع أو بدون إضافة الهرمونات (FSH,LH, E2) تؤدى إلى تحسن معدل نضج بويضات الأرانب وكذلك تطورها المعملى اللاحق.
وينصح بإضافة الإنسولين بتركيز 10 ميكرو جرام/مل إلى بيئة الإنضاج المعملى حيث أنها أدت إلى تحسن معنوي بالنسبة للتطور المعملى اللاحق لبويضات الأرانب النيوزيلاندى الأبيض.