Search In this Thesis
   Search In this Thesis  
العنوان
Studies on inulinase producing bacteria /
المؤلف
El-sawah, Ahmed Mahmoud Mohamed Awad-Allah.
هيئة الاعداد
باحث / أحمد محمود محمد عوض الله السواح
مشرف / محمد منصور قاسم
مشرف / فتحى إسماعيل على حوقھ
مشرف / عايدة حافظ عفيفى عامر
مناقش / همت محمد محمد عبد الهادى
الموضوع
Microbiology.
تاريخ النشر
2013.
عدد الصفحات
106 p. :
اللغة
الإنجليزية
الدرجة
ماجستير
التخصص
العلوم الزراعية والبيولوجية
تاريخ الإجازة
1/1/2013
مكان الإجازة
جامعة المنصورة - كلية الزراعة - الميكروبيولوجى
الفهرس
Only 14 pages are availabe for public view

from 127

from 127

Abstract

يعتبر إنزيم الإنيولينيز من أهم الإنزيمات المستخدمة فى العديد من النواحىالصناعية مثل الصناعات الغذائية والدوائية وبصفة خاصة إنتاج شراب الفركتوز،السكريات العديدة،الإيثانول الحيوى،الزيت وحيد الخلية،البروتين وحيد الخلية والعديد من المنتجات الأخرى ، وتوفر المصادر الميكروبية المختلفة من الفطريات والخمائر والبكتريا عدد من إنزيمات الإنيولينيز المتباينة الخصائص التى تلبى الإحتياجات الصناعية.وعلى الرغم من أن كمية الإنزيم المنتج من البكتريا لا تقارن بالكمية التى تنتجهاكل من الفطريات والخمائر،إلا أن الإنزيمات المنتجة من البكتريا تتمتع بخصائص مميزة، مما يجعلها ذات أهمية خاصة فى العديد من التطبيقات الصناعية.وقد تناولت الدراسة النقاط التالية :
- عزل وتنقية عزلات بكتيرية لها القدرة على إنتاج إنزيم الإنيولينيز.
- انتخاب هذه العزلات على حسب قدرتها الإنتاجية ، وتعريف أكثر العزلات كفاءة فى الإنتاج.
- دراسة بعض العوامل المؤثرة على إنتاج إنزيم الإنيولينيز.
- دراسة بعض العوامل المؤثرة على النشاط الإنزيمى،وكذلك الثبات الحرارى للإنزيم.
ويمكن تلخيص النتائج التى تم الحصول عليها على النحو التالى :
الفصل الأول: عزل وحصر وتعريف بعض العزلات البكتيرية المنتجة لإنزيم
الإنيولينيز :<brاإستهدفت هذه التجربة عزل وتنقية بعض العزلات البكتيرية المنتجة لإنزيم الإنيولينيز ،
وانتخاب أفضلها على حسب قدرتها الإنتاجية ، وتعريف أكثر العزلات كفاءة فى الإنتاج.
ويمكن تلخيص النتائج المتحصل عليها على النحو التالى :
١) تم عزل ١٩ عزلة بكتيرية من منطقة ريزوسفير نبات الشيكوريا الغنى ) بالإنيولين ، على بيئة تحتوى على الإنيولين كمصدر وحيد الكربون ، ثم تنقيتهاعلى نفس البيئة.
٢) تم اختبار ال ١٩ عزلة لمعرفة قدرتها الإنتاجية للإنزيم ، وذلك بتقدير )النشاط الإنزيمى على فترات من ٦ إلى ١٢٠ ساعة ،وقد أظهرت جميع العزلات مقدرة متفاوته على إنتاج الإنزيم.
٣) تم تعريف أكفأ ٧ عزلات منتجة للإنزيم ، ومن خلال دراسة خواصها ) المورفولوجية والبيئية والفسيولوجية تبين أن ثلاثة منهم يتبعوا جنس.Acetobacter وأربعة يتبعوا جنس ، Arthrobacter ٤) إختير أعلى ميكروبين تبعاً للنشاط الإنزيمى وهما )كأكفأ بكتريا منتجة Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. 19 للإنيولينيز لإجراء بقية التجارب عليهما،وقد وصل النشاط الإنزيمى لأقصاهبعد ٤٨ ساعة من التحضين.
الفصل الثانى: العوامل المؤثرة على إنتاج إنزيم الإنيولينيز:إستهدفت تجارب هذا الفصل توفير الظروف المثلى لإنتاج الإنيولينيز من العزلات الأكثر كفاءة فى إنتاج الإنزيم. Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. البكتيرية 19
ويمكن تلخيص النتائج المتحصل عليها على النحو التالى :
١) أدت إضافة السكروز بنسبة ١% (وزن/حجم) كأحد مصادر الكربون ، إلى )البيئة المستخدمة فى الإنتاج والتى تحتوى على الإنيولين كمحفز للإنزيم إلىزيادة فى إنتاج الإنزيم ، بينما مصادر الكربون الأخر ى أدت لحدوث تثبيط لإنتاج الإنزيم ، وذلك بالنسبة للإنزيم المنتج من كل من .Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. 19
٢) بالنسبة لمصادر النيتروجين ، كانت كبريتات الأمونيوم هى )أفضل المصادر حثاً على إنتاج الإنزيم ، لكل من .Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. 19 المثلى للإنتاج للبيئة المستخدمة هى ٧ فى حالة pH ٣) كانت درجة ال ) كان مدى Acetobacter sp. أما بالنسبة ل 19 ، Arthrobacter sp. 6 ٧ ، كم ا pH من ٧ إلى ٨ هو الأفضل للإنتاج ، وكان أقصى إنتاج عند pH أقل من ٦ ، بالنسبة pH لوحظ عدم وجود نمو كافى وإنتاج إنزيم مناسب عند .Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. لكل من 19
٤) وجد أن استخدام حجم لقاح ٥% (حجم/حجم) هو الأفضل لإنتاج الإنزيم )، كما لوحظ وجود زيادة تدريجية فى إنتاج الإنزيم حتى نسبة٥ %(حجم/حجم) ، ثم انخفض الإنتاج وذلك لكل<Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. من 19٥) وجد أن درج ة الحرارة المثلى لإنتاج إنزيم الإنيولينيز هى ٣٠ °م لكل من ولقد أظهرت العزلتان قدرة ، Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. 19 ٤٣٧ °م ، وكانت أفضل درجة حرارة - على النمو فى مدى حرارى من ٢٥ هى ٢٥ °م ، بينما فى حالة Arthrobacter sp. لنمو 6كانت ٣٥ °م. Acetobacter sp. 19
الفصل الثالث : العوامل المؤثرة على نشاط إنزيم الإنيولينيز :إستهدفت تجارب هذا الفصل تحديد الظروف المثلى لنشاط إنزيم الإنيولينيز المنتجوكذلك دراسة الثبات الحرارى Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. من 19 للإنزيم.
ويمكن تلخيص النتائج المتحصل عليها على النحو التالى :
١) بدراسة تأثير درجة الحموضة على النشاط الإنزي مى ، بالنسبة للإنزيم المنتج )٧,٥ هو الأفضل للنشاط - من ٥ pH وجد أن مدى Arthrobacter sp. من 6٧,٥ هى المثلى للنشاط الإنزيمى، ولقد pH الإنزيمى ، وكانت درجة ال
٤,٥ ، كما pH احتفظ الإنزيم ب ٥٥,١٦ % من نشاطه الأصلى عند درجة٨ و ٨,٥ pH احتفظ ب ٦٦,٢٤ و ٦٣,١٥ % من نشاطه الأصل ى عند درجة على الترتيب ، فى حين انخفضت هذه القيمة لتكون ٥١,٩٦ % عند درجة المثلى للإنزيم المنتج من pH ٩ ، على الجانب الأخر كانت درجة ال pH
pH هى ٧ ، ولوحظ أن الإنزيم يعمل بكفاءة فى مدى Acetobacter sp. 19٧,٥ ، واحتفظ الإنزيم ب ٩٥,١٣ و ٩٦,٦٢ % من نشاطه الأصلى - من ٥% ٦,٥ و ٧,٥ على الترتيب ، كما احتفظ الإنزيم ب ٦٠,٠٠ pH عند درجة
% ٤,٥ ، واحتفظ ب ٧٥,١٦ و ٧١,٨٩ pH من نشاطه الأصلى عند درجة٨ و ٨,٥ على الترتيب ، والتى انخفضت pH من نشاطه الأصلى عند درجة
.٩ pH إلى ٦٤,٢٣ % عند درجة
٢) بدراسة تأثير درجة الحرار ة على النشاط الإنزيمى ، وجد أن الإنزيم يعمل )بكفاءة فى مدى واسع من درجات الحرارة من ٣٠ °م وحتى ٧٠ °م ، وكان أقصى نشاط للإنزيم عند ٥٠ °م للإنيولينيز المنتج من ٥حيث لوحظ وجود زيادة ، Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. 19 تدريجية فى النش اط الإنزيمى فى مدى حرارى من ٣٠ °م إلى ٥٠ °م ، ثم انخفض النشاط الإنزيمى بزيادة درجة الحرارة عن ٥٠ °م.
٣) تم دراسة الثبات الحرارى للإنزيم الخام منفردأ وذلك بتسخينه على درجات )
حرارة من ٣٠ °م وحتى ٩٠ °م لمدة ٣٠ دقيقة ، وجد أن الإنزيم لم يتأثر بالتسخين على ٣٠ °م حيث كانت قيمة النشاط مساوية لتلك غير المعاملةحرارياً ، كم ا احتفظ الإنزيم بأكثر من ٨٠ % من نشاطه الأصلى بعد تسخينه على درجات حرارة من ٣٠ °م إلى ٥٠ °م لمدة نصف ساعة لكل من بالنسبه للإنزيم المنتج من ، Arthrobacter sp. 6, Acetobacter sp. 19
احتفظ ب ٩٣,١٤ و ٨١,٠٨ % بعد تسخينه على Arthrobacter sp. 6
٤٠ °م و ٥٠ °م على الترتيب ثم انخفض النشاط بعد ذلك حيث فقد حوالى ٦٨,٥٧ % من نشاطه الأصلى بعد تسخينه على ٧٠ °م لمدة ٣٠ دقيقة ، أما% احتفظ ب ٨٦,٢٤ و ٨١,٦٨ Acetobacter sp. الإنزيم المنتج من 19 بعد تسخينه على ٤٠ °م و ٥٠ °م على الترتيب ثم انخفض النشاط بعد ذلك حيث فقد ٦٠,٣٥ % من نشاطه الأصلى بعد تسخينه على ٧٠ °م لمدة ٣٠ دقيقة.